小鼠血栓前体蛋白免疫试剂盒实验时应该必备的条件

小鼠血栓前体蛋白免疫试剂盒实验时应该必备的条件
1．固相载体的选择载体的种类很多，其中包括纤维素、交联右旋糖酐、葡萄球菌聚苯乙烯、聚丙烯酰胺等。从使用形式上可有凹孔平板、试管、珠粒等。 
聚苯乙烯凹孔板是应用zui广泛的一种载体。聚苯乙烯塑料微量滴定板吸附蛋白的性能好，操作简便、用量小，适于大批检查。 
由于聚苯乙烯的工艺过程不够稳定,造成各批次差异较大。所以进行ELISA之前，必须进行筛选。检查方法： 
⑴ 吸附性能的检查：先加抗体包被，然后加入同一稀释度的酶标抗体，zui后加底物、显色、测OD值,求出总平均OD值,再求出每相邻两孔的OD平均值,此均值在总均值的±10%以内为合格,若中间孔与四周孔OD值相差太大，或一侧与另一侧孔OD值相差较大均属不合格。 
⑵ 对比测定阳性血清与阴性血清，观察是否存在明显差异，若二者OD值相差于10倍以上者为合格。 
板的处理。新板一般不用处理,用蒸馏水冲洗即可应用。板用一次即废。但不少实验工作者认为用超声波处理，清洁液Tritonx100、20%乙二醇处理仍可应用。但发现空白对照显色较深和阳性样品显色结果不理想时，应弃去不用。 
2．载体的吸附条件  载体的吸附均为物理吸附。吸附的多少取决于PH值、温度、蛋白浓度、离子强度以及吸附时间等。 
较好的吸附条件是：离子强度为0.05Mol/L～0.10Mol/L，pH9.0～pH9.6碳酸盐缓冲液，蛋白浓度为1μg/ml~100μg/ml，4℃过一夜或37℃3h。 
3．酶标抗体使用浓度的确定于聚苯乙烯板孔中加足够量的抗体包被,温育一定时间，冲洗、把酶标结合物倍比稀释，每个稀释度加2孔,温育、冲洗、再加底物显色、比色。以OD值为纵坐标,酶标结合物的稀释度为横坐标，制作曲线。找出OD值为1时，进口Elisa试剂盒相对应的酶标抗体稀释度为zui适酶标抗体稀释度。 
这个稀释度是指在这种条件下的zui适稀释度，换个条件就不是zui适的了。如1﹕400的酶标抗体稀释度温育6h可与1︰6 400稀释度温育24h结果相同。所以一旦条件确定之后，就不要变更，以保证结果的重复性和相对的准确性。 
此zui适酶标抗体稀释度可做为工作浓度，也可提高半个至一个滴度，但不能提高过高，否则非特异性显色增加。 
酶标抗体的滴度反映酶标抗体的质量，也可以此比较酶标结合物的优劣。有材料报道认为1︰320滴度为合格,1︰1 000以上更好。酶标抗体滴度越高，用于工作浓度的稀释倍数就越大，敏感性就越高，非特异性反应就越低。 
4．抗原： 
⑴ 抗原的要求： 
用于ELISA的抗原必须采用相当纯的抗原，如果含有其它杂质，将与抗原共同竞争固相载体上的有限位置。用于其它血清学反应的抗原不一定能适用ELISA实验，必须经过试验，抗原必须能牢固地吸附于载体上，而不丧失其免疫活性，且可得到有规律的重复的结果。另外在吸附载体后，对加入的各种试剂产生zui小的非特异性吸附，即与阴、阳性血清结合差异较大。 
⑵ 抗原效价的测定  可采用单方阵或双方阵试验。①单方阵试验：以不同稀释度的抗原包被酶标板，以常规的1﹕200倍稀释的阳性血清加入，再加入酶标抗体、显色、测OD值，以OD值为1.0时，相应的抗原浓度作为使用效价；②双方阵试验比较，它既能测出抗原的zui适浓度又能测出抗体的zui适浓度。即将抗原抗体均稀释成不同浓度进行酶标抗体反应，以血清稀释倍数zui高的阴、阳性血清的光吸收值差zui大的所对应的抗原稀释度为抗原的使用效价。 
富酪蛋白(STATH)ELISA试剂盒 ，英文名： STATH ELISA Kit
副肿瘤抗原MA2(PNMA2)ELISA试剂盒 ，英文名： PNMA2 ELISA Kit
复制启动因子1(REPIN1)ELISA试剂盒 ，英文名： REPIN1 ELISA Kit
复制蛋白A1(RPA1)ELISA试剂盒 ，英文名： RPA1 ELISA Kit
复合素4(CPLX4)ELISA试剂盒 ，英文名： CPLX4 ELISA Kit
复合素3(CPLX3)ELISA试剂盒 ，英文名： CPLX3 ELISA Kit
复合素2(CPLX2)ELISA试剂盒 ，英文名： CPLX2 ELISA Kit
复合素1(CPLX1)ELISA试剂盒 ，英文名： CPLX1 ELISA Kit
辅酶Q10同源物B(COQ10B)ELISA试剂盒 ，英文名： COQ10B ELISA Kit
辅激活因子激活因子(COAA)ELISA试剂盒 ，英文名： COAA ELISA Kit
辅肌动蛋白α4(ACTN4)ELISA试剂盒 ，英文名： ACTN4 ELISA Kit
辅肌动蛋白α3(ACTN3)ELISA试剂盒 ，英文名： ACTN3 ELISA Kit
辅肌动蛋白α2(ACTN2)ELISA试剂盒 ，英文名： ACTN2 ELISA Kit
辅肌动蛋白α1(ACTN1)ELISA试剂盒 ，英文名： ACTN1 ELISA Kit
弗林蛋白酶(FUR)ELISA试剂盒 ，英文名： FUR ELISA Kit
封闭蛋白9(CLDN9)ELISA试剂盒 ，英文名： CLDN9 ELISA Kit
封闭蛋白8(CLDN8)ELISA试剂盒 ，英文名： CLDN8 ELISA Kit
封闭蛋白7(CLDN7)ELISA试剂盒 ，英文名： CLDN7 ELISA Kit
封闭蛋白6(CLDN6)ELISA试剂盒 ，英文名： CLDN6 ELISA Kit
封闭蛋白5(CLDN5)ELISA试剂盒 ，英文名： CLDN5 ELISA Kit
封闭蛋白3(CLDN3)ELISA试剂盒 ，英文名： CLDN3 ELISA Kit
封闭蛋白25(CLDN25)ELISA试剂盒 ，英文名： CLDN25 ELISA Kit
封闭蛋白24(CLDN24)ELISA试剂盒 ，英文名： CLDN24 ELISA Kit
封闭蛋白23(CLDN23)ELISA试剂盒 ，英文名： CLDN23 ELISA Kit
封闭蛋白22(CLDN22)ELISA试剂盒 ，英文名： CLDN22 ELISA Kit
封闭蛋白20(CLDN20)ELISA试剂盒 ，英文名： CLDN20 ELISA Kit
封闭蛋白2(CLDN2)ELISA试剂盒 ，英文名： CLDN2 ELISA Kit
封闭蛋白19(CLDN19)ELISA试剂盒 ，英文名： CLDN19 ELISA Kit
封闭蛋白17(CLDN17)ELISA试剂盒 ，英文名： CLDN17 ELISA Kit
封闭蛋白16(CLDN16)ELISA试剂盒 ，英文名： CLDN16 ELISA Kit
封闭蛋白15(CLDN15)ELISA试剂盒 ，英文名： CLDN15 ELISA Kit
封闭蛋白14(CLDN14)ELISA试剂盒 ，英文名： CLDN14 ELISA Kit
封闭蛋白12(CLDN12)ELISA试剂盒 ，英文名： CLDN12 ELISA Kit
封闭蛋白11(CLDN11)ELISA试剂盒 ，英文名： CLDN11 ELISA Kit
封闭蛋白10(CLDN10)ELISA试剂盒 ，英文名： CLDN10 ELISA Kit
封闭蛋白1(CLDN1)ELISA试剂盒 ，英文名： CLDN1 ELISA Kit
粪卟啉原氧化酶(CPOX)ELISA试剂盒 ，英文名： CPOX ELISA Kit
分泌型磷蛋白2(SPP2)ELISA试剂盒 ，英文名： SPP2 ELISA Kit
分泌球蛋白家族2A成员2(SCGB2A2)ELISA试剂盒 ，英文名： SCGB2A2 ELISA Kit
分泌粒蛋白Ⅴ(SCG5)ELISA试剂盒 ，英文名： SCG5 ELISA Kit
分泌粒蛋白Ⅲ(SCG3)ELISA试剂盒 ，英文名： SCG3 ELISA Kit
分泌粒蛋白Ⅱ(SCG2)ELISA试剂盒 ，英文名： SCG2 ELISA Kit
分泌跨膜蛋白1(SECTM1)ELISA试剂盒 ，英文名： SECTM1 ELISA Kit
分离蛋白3(SCRN3)ELISA试剂盒 ，英文名： SCRN3 ELISA Kit
分离蛋白2(SCRN2)ELISA试剂盒 ，英文名： SCRN2 ELISA Kit
分离蛋白1(SCRN1)ELISA试剂盒 ，英文名： SCRN1 ELISA Kit
分拣连接蛋白9(SNX9)ELISA试剂盒 ，英文名： SNX9 ELISA Kit
分拣连接蛋白8(SNX8)ELISA试剂盒 ，英文名： SNX8 ELISA Kit
分拣连接蛋白7(SNX7)ELISA试剂盒 ，英文名： SNX7 ELISA Kit
分拣连接蛋白6(SNX6)ELISA试剂盒 ，英文名： SNX6 ELISA Kit
分拣连接蛋白5(SNX5)ELISA试剂盒 ，英文名： SNX5 ELISA Kit
分拣连接蛋白4(SNX4)ELISA试剂盒 ，英文名： SNX4 ELISA Kit
分拣连接蛋白3(SNX3)ELISA试剂盒 ，英文名： SNX3 ELISA Kit
分拣连接蛋白2(SNX2)ELISA试剂盒 ，英文名： SNX2 ELISA Kit
分拣连接蛋白19(SNX19)ELISA试剂盒 ，英文名： SNX19 ELISA Kit
分拣连接蛋白17(SNX17)ELISA试剂盒 ，英文名： SNX17 ELISA Kit
分拣连接蛋白16(SNX16)ELISA试剂盒 ，英文名： SNX16 ELISA Kit
分拣连接蛋白15(SNX15)ELISA试剂盒 ，英文名： SNX15 ELISA Kit
分拣连接蛋白14(SNX14)ELISA试剂盒 ，英文名： SNX14 ELISA Kit
分拣连接蛋白13(SNX13)ELISA试剂盒 ，英文名： SNX13 ELISA Kit