第八因子相关抗原（FⅧAg）ELISA试剂盒保存

第八因子相关抗原（FⅧAg）ELISA试剂盒技术保存条件及有效期

1．试剂盒保存：2-8℃。

2．有效期：6个月

操作步骤

1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

12µg/L5号标准品150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释液

6µg/L4号标准品150µl的5号标准品加入150µl标准品稀释液

3µg/L3号标准品150µl的4号标准品加入150µl标准品稀释液

1.5µg/L2号标准品150µl的3号标准品加入150µl标准品稀释液

0.75µg/L1号标准品150µl的2号标准品加入150µl标准品稀释液

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl，待测样品孔中先加样品稀释液40µl，然后再加待测样品10µl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50µl，再加入显色剂B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10.第八因子相关抗原（FⅧAg）ELISA试剂盒终止：每孔加终止液50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。