人组织因子(TF)ELISA试剂操作步骤

产品名称：人组织因子(TF)ELISA试剂
英文名称： Human Tissue Factor (TF) ELISA Kit
灵敏度：4.69 pg/mL
检测范围：7.81-500 pg/mL
特异性：可检测样本中的人组织因子，且与其类似物无明显交叉反应。
重复性：三种不同浓度的样本在同一块板子上分别检测20次，以及在不同的板子上分别检测20次，板内和板间变异系数均小于10%。
回收率：分别往稀释不同倍数的5个样本中加入已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。  
保存温度： 2-8℃
应用：用于人血清、血浆或其他相关生物液体中组织因子的测定。

本试剂盒采用的是双抗体夹心法酶联免疫吸附检测技术（ELISA）。测定样品中人组织因子水平。向预先包被了抗人组织因子抗体的酶标孔中，加入标准品和样本，温育后，加入生物素标记的抗组织因子抗体。再与HRP标记的链霉亲和素结合，形成免疫复合物，再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入显色底物TMB，产生蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。后，在450 nm处测定反应孔样品吸光度（OD）值，样本中的人组织因子浓度与OD值成正比，通过绘制标准曲线计算出样本中人组织因子的浓度。

典型数据及参考曲线
由于实验操作条件的不同（ 如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等），标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度（pg/mL）     1000     500     250     125     62.5     31.25     15.62     0
OD值     2.22     1.56     0.92     0.63     0.42     0.25     0.18     0.08
校正OD值     2.14     1.48     0.94     0.55     0.34     0.17     0.1     -

重复性
板内变异系数小于10%，板间变异系数小于10%

回收率
在选取的健康人血浆 中加入3个不同浓度水平的人TF，计算回收率
样本类型     范围     平均回收率
血浆 (n=8)     92-105     102

线性稀释
分别在选取的4份健康人血浆 中加入高浓度人TF，在标准曲线动力学范围内进行稀释，评估线性。
稀释比例     回收率（%）     血浆
1：2     范围（%）     88-96
平均回收率（%）     93
1：4     范围（%）     87-108
平均回收率（%）     98

注：ELISA试剂盒检测范围等数据，因检测样本 的不同而调整，实际数据以随货说明书为准。