人干扰素诱导T细胞趋化因子(ITAC/CXCL11)ELISA试剂盒操作步骤

产品名称：人干扰素诱导T细胞趋化因子(ITAC/CXCL11)ELISA试剂盒
英文名称： Mouse Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITAC;CXCL11) ELISA Kit
实验类型： 双抗体夹心法
检测范围： 31.2-2000pg/mL
灵敏度： 15.2pg/mL
种属： 小鼠
保存温度： 2-8℃
样本类型： 血清, 血浆, 组织匀浆,细胞裂解液,细胞培养上清 和 其他生物液体

本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中人干扰素诱导T细胞趋化因子（ITAC/CXCL11）含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人干扰素诱导T细胞趋化因子（ITAC/CXCL11）水平。用纯化的人干扰素诱导T细胞趋化因子（ITAC/CXCL11）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入干扰素诱导T细胞趋化因子（ITAC/CXCL11），再与HRP标记的干扰素诱导T细胞趋化因子（ITAC/CXCL11）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的干扰素诱导T细胞趋化因子（ITAC/CXCL11）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人干扰素诱导T细胞趋化因子（ITAC/CXCL11）浓度。

ITAC;CXCL11 简介

干扰素诱导的 T 细胞趋化因子（I-TAC）也被称为 C-X-C 动点趋化因子 11（CXCL11）和干扰素-γ诱导的蛋白 9（IP-9），是一种蛋白质，由 CXCL11 基因编码。C-X-C 动点趋化因子 11 是属于 CXC 趋化因子家族的一种小型细胞因子。它在外周血白细胞、胰腺和肝脏中高度表达，在胸腺、脾脏和肺中适度表达，在小肠、胎盘和前列腺中表达水平较低。CXCL11 的基因表达被IFN-γ和 IFN-β强烈诱导，被 IFN-α弱诱导。这种趋化因子通过与细胞表面的趋化因子受体 CXCR3 相互作用而对其靶细胞产生影响，其亲和力高于该受体的其他配体 CXCL9 和 CXCL10。
 
特异性
可检测样本中小鼠的ITAC;CXCL11，且与其类似物无明显交叉反应。
 
典型数据及参考曲线
由于实验操作条件的不同（ 如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等），标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

浓度（pg/mL）     2000     1000     500     250     125     62.5     31.2     0
OD值     2.22     1.56     0.92     0.63     0.42     0.25     0.18     0.08
校正OD值     2.14     1.48     0.94     0.55     0.34     0.17     0.1     -

重复性
板内变异系数小于10%，板间变异系数小于10%

回收率
在选取的健康小鼠血清、血浆、细胞培养上清中加入3个不同浓度水平的小鼠ITAC;CXCL11，计算回收率

样本类型     范围     平均回收率
血清(n=8)     84-101     96
血浆(n=8)     92-105     102
细胞培养上清(n=8)     96-108     105

线性稀释
分别在选取的4份健康小鼠血清、血浆、细胞培养上清中加入高浓度小鼠ITAC;CXCL11，在标准曲线动力学范围内进行稀释，评估线性。

稀释比例     回收率（%）     血清     血浆     细胞培养上清
1：2     范围（%）     84-95     88-96     90-110
平均回收率（%）     91     93     96
1：4     范围（%）     89-103     87-108     105-115
平均回收率（%）     94     98     108

注：ELISA试剂盒检测范围等数据，因检测样本 的不同而调整，实际数据以随货说明书为准。