抚生试剂-根据ELISA试剂盒检测目的和操作步骤不同有三种基本方法

根据ELISA试剂盒检测目的和操作步骤不同有三种基本方法
      ●双抗体（原）夹心法 检测抗原（体）的常见方法，应用针对抗原两个不同决定族的两种单抗分别作为固相载体和酶标抗体检测溶液中的抗原（适用于二价以上抗原,不能测 小分子半抗原）。
●间接法 检测抗体的方法，利用酶标记的抗抗体（第二抗体）检测已与固相抗原结合的抗体。

●竞争法 检测抗原或小分子半抗原、抗体，以测抗原为例，使待测抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合，结果如待测抗原含量越多，与固相抗体结合的酶标抗原就越少，显色越浅，二者呈负相关。●ELISA试剂盒是一种敏感性高、特异性强、重复性好的实验诊断方法，由于其试剂稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素，以及既适宜于大规模筛查试验又可以用于少量标本的检测，既可以做定性试验也可以做定量分析等优点，已广泛应用于微生物学、寄生虫学、肿瘤学和细胞因子等领域。ELISA试剂盒的影响因素较多，加强质量管理才能充分发挥其方法学的优点。
分析前质控
●人员培训 实验是***作的，因此检验人员需经过培训，熟练掌握本专业如下几方面的技术知识：
◎检验项目的基本原理 （ELISA试剂盒原理）;
◎临床意义;
◎熟悉检测技巧，了解易出差错的环节及难点;
◎熟悉检测试剂性能（包括试剂盒组成，包被片段及其组成）;
◎ 熟悉检测仪器的原理及性能;掌握数据处理的能力和质量控制知识。
◎某些特殊项目的检测如抗HIV等需经有关部门组织的专门培训班，考试合格后持证上岗。
分析前质控
1971年Engvall等人把免疫组化的EIA技术应用于临床检验发展为ELISA试剂盒技术。
特点 ：在固相表面组装免疫活性物质形成"免疫吸附剂"
酶标记免疫活性物质，进行信号放大;
有二步温育反应二次洗涤过程;
灵敏度特异性相对较高。
局限性：只能检测到ng水平
度差（批内CV15-20%）;
线性范围窄（一个数量级）;