如骨髓细胞的集落形成试验和胸腺细胞(脾细胞)的增殖试验,或用体外培养的依赖细胞因子才能生长的细胞因子依赖株及对细胞因子杀伤敏感的细胞作为靶细胞。ELISA试剂盒细胞因子还能诱导靶细胞表达某些表面分子或分泌一些蛋白质,可以用荧光素标记抗体检测表达相应分子的细胞数,或用特定方法测定细胞分泌的蛋白质,间接了解细胞因子的活性。其测定方法可分为促进细胞增殖和增殖抑制法、抗病毒活性测定法、集落形成法、趋化作用测定法及细胞因子诱导产物测定法等。前者的增殖细胞数与细胞因子的含量成正比,而后者的增殖细胞数与细胞因子的含量成反比。
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
24ng/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12ng/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6ng/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3ng/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5 ng/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
ELISA试剂盒检测细胞因子促生长活性或抑制生长活性是将不同稀释度的待测样品或细胞因子标准品与培养的细胞株共同培养一定时间,然后检测增殖的细胞数。此外,测定代谢产物荧光强度的方法也可检测增殖细胞数,如ATP法和cAMP法。