RNeasy Mini Kit (250) 74106QIAGEN新说明书
从细胞、组织或酵母中纯化至多100 μg的总RNA
Performance
RNeasy Mini Kit可从至多30 mg动物或人类组织样本，或从100–1 x 107个动物或人类细胞样本或酵母中纯化总RNA（参见RT-PCR of RNA from as few as 100 cells和High-quality RNA from a variety of samples）。
| 样本来源 | 起始材料 | 平均产量（µg） |
|---|---|---|
| 动物细胞 LMH HeLa COS-7 淋巴细胞（未受激） |
1 x 106 1 x 106 1 x 106 1 x 106 |
12 15 35 0.5 |
| 小鼠组织 肝 肺 脾 |
10 mg 10 mg 10 mg |
40 10 35 |
| 真菌细胞 S. cerevisiae |
1 x 107 |
25 |
Principle
RNeasy Mini Kit可从少量的样本中纯化总RNA。RNeasy纯化技术整合了苯酚/异硫氰酸胍裂解的严谨性和硅胶膜纯化的速度和纯度，简化了总RNA纯化技术。纯化得到高品质的RNA，并且DNA残留水平达到zui低。
Procedure
RNeasy Mini Kit可从10–1 x 107个动物或人类细胞中、0.5–30 mg动物或人类组织中或小于5 x 107个酵母细胞中方便的纯化总RNA。先对样本进行破碎和匀浆。在裂解物中加入乙醇以提供合适的结合条件。然后将裂解物上样至RNeasy硅胶膜（参见RNeasy Mini spin column）。RNA结合到膜上（多可结合100 µg），污染物被洗去。对于某些对少量DNA十分敏感的RNA应用，可在RNeasy操作过程中进行柱上DNA酶处理，去除DNA残留。之后可在30–100 µl的纯水洗脱液中得到高浓度的纯化RNA（参见RNeasy Mini procedure）。还有各种特殊应用的实验方案可供选择。
Applications
使用RNeasy技术纯化得到的RNA的A260/280比为1.9–2.1（10 mM Tris·Cl、pH 7.5的溶液中），适用于多种下游应用，包括：
- Northern印迹、点印迹和狭缝印迹
- 终点式RT-PCR
- 定量real-time RT-PCR
- 芯片分析
- Poly A+ RNA筛选
