A4004M 2x SYBR Green定量PCR试剂盒

2x SYBR Green定量PCR试剂盒 产品概述比对( biwriter ) 2×SYBR Green PCR Master Mix 是采用 SYBR Green I 嵌合荧光法进行 Real Time PCR 的专用试剂。含有常温下完全封闭Taq 酶活性的热启动酶 HS Taq DNA Polymerase,能够有效抑制低温条件下引物非特异性退火或者引物二聚体引起的非特异性扩增

厦门比对科技有限公司（Xiamen Biocontrast SciTech Co.,Ltd），是一家成立于2015年经营生命科学用品企业,公司主要代理各大著名生物公司的试剂、仪器、设备和耗材等。同时提供各类生物技术服务、协助科研设计和数据处理、组织国内和学术会议、提供相关网络服务等。目前，主要代理和经销的国外生物公司有：Lonza(原Cambrex）、MPBiomedicals(MP、Qbiogene、ICN）、CORNING、ENZO Life Sciences(Alexis、Biomol、Enzo)、Axxora(Alexis)、Cryologic、Mobitec、Tharmac。产品涉及：细胞生物学、分子生物学、免疫学、食品与水质检测、实验室及医疗试剂、设备。客户群体涉及学校，医院，政府，科研单位，检测单位，药厂及食品公司等各大行业。 厦门比对科技有限公司 http://www.biwriter.com 联系人：李先生 手机：18059820736 邮箱：1409358961@qq.com

 

产品组成

A4004S

A4004M

2×SYBR Green PCR Master Mix

1ml

5×1ml

 

储存条件：

本产品-20℃保存有效期至少一年，4℃可保存3个月。解冻后应充分混匀，避免产生大量气泡。避光保存。-20°C保质期两年。2-8°C保质期三个月。避免反复冻融。

 

试剂原理：

本产品利用热启动酶HS Taq DNA polymerase 进行 qPCR 扩增反应，通过扩增产物嵌合SYBR  Green  I 而激发的荧光信号强度进行检测。

1、 PCR

PCR 法是以微量 DNA 进行目的片段扩增的方法。通过 DNA 链的热变性、引物退火、

DNA 聚合酶作用下引物的延伸三个步骤循环往复，可在短时间内扩增大量 DNA 片段。

2、 荧光检出

SYBR Green I 是一种结合与小沟中的双链 DNA 结合染料，与双链 DNA 结合后，其荧光大大增强，大吸收波长约为 497nm，发射波长大约为 520nm。

SYBR Green I 可以与所有的双链 DNA 相结合，无需使用探针，即可实现检测，通用性好，且灵敏度很高。但是，由于 SYBR Green I 与所有的双链 DNA 相结合，因此由引物二聚体、单链二级结构以及错误的扩增产物引起的假阳性会影响定量的性。在定量仪器检测过程中，可以通过测量升高温度后荧光的变化，由解链曲线来分析产物的均一性，从而区分产物的溶解峰温度而区分特异与非特异的产物。

 

使用方法：

反应条件

     1、 两步法

热启动：95℃ 10  分钟；

变 性：95℃ 10～20 秒；

退火/延伸：60℃ 20～60 秒。

溶解曲线分析。

 

 2、 三步法

热启动：95℃ 10  分钟；

变 性：95℃ 10～20 秒；

退 火 ：56-64℃ 10～30 秒

延  伸：72℃ 10～60 秒。溶解曲线分析。

对于 Roche LightCycler480，热启动时间应采用 10min，ABI7500 也可以采用 5min 热启动。

qPCR反应体系配制：

建议的模板量 10～100ng（基因组 DNA）或 1～10ng（cDNA 模板）。

试剂

20μl 体系

50μl 体系

终浓度

2×SYBR Green PCR Master Mix

10μl

25μl

1×

Primer 1（10μM）

0.4～2μl

1～5μl

0.2～1.0μM

Primer 2（10μM）

0.4～2μl

1～5μl

0.2～1.0μM

Template DNA

4μl

10μl

ddH2O

Total volume

20μl

50μl

比对qPCR试剂合的性能与特点

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1.比对品牌qPCR试剂盒这个产品也供应一些临床诊断产品开发的企业，在GMP车间生产，质控与性能更有保证；

2.比对品牌qPCR试剂盒使用热启动酶，不是普通TAQ酶;

3.?性能不逊于进口品牌的；

4.?可提供试用装，比进口很多，比国产的略贵点，不错的；

5.?已提供厦门大学、华侨大学及医学院等科研机构使用。

注意事项：

1、 SYBR Green PCR Master Mix 经过特殊配制，采用热启动酶，具有更高特异性；

2、 对于退火温度较低的引物或超过 200bp 长片段扩增建议采用三步法；

 3、 扩增前后要使用专用的区域和移液器，戴手套操作并经常更换，PCR 反应完成后切勿打开反应管。以大限度减少 PCR 产物对样品的污染。

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