凝固血液DNA提取试剂盒说明书
产品编号：BTN71002
规格：30T/100T
产品及特点：
凝固血液DNA提取试剂盒是百奥莱博开发的专门提取新鲜或冷冻凝固血液基因组DNA 的试剂盒。本产品具有下列特点:
1.DNA 纯净，OD260/280 在1.8-2.0之间，可直接用于PCR、酶切、杂交等。提取得到的DNA 大小在30-50Kb之间。
2.每mL 新鲜凝固全血DNA 产量为20-50μg左右，每mL冻存的凝固全血DNA产量为2-10μg左右。
3.安全，本试剂盒对人体，无腐蚀性和刺激性气味。
4.操作快速，整个过程在30分钟内即可完成。
规格及成分：
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成分 |
30T |
100T |
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溶液A |
15ml |
50ml |
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溶液B |
15ml |
50ml |
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说明书 |
1份 |
1份 |
保存条件：
常温运输及保存，有效期一年。
自备试剂：
氯fang、异丙醇、75%乙醇。
使用方法：
1. 65℃预热溶液A，待其沉淀溶化后，充分混匀，取0.5 mL 加入到10-15mL塑料离心管中并放置于65℃待用。
2. 称取新鲜凝固血液组织0.5 g 左右(如果是干的血块，只需要50 mg 左右并需要剪成微小的碎片)，加入到上步的溶液A 中匀浆，直到。匀浆过程中将产生大量泡沫，属于正常现象。
3. 将匀浆液置于65℃水浴保温5 分钟，然后将匀浆液(包括凝固血液碎片)全部转移到新的1.5 mL 塑料离心管中。
4. 12000-15000 g 室温离心3 分钟，将上清转移到新的1.5 mL塑料离心管中(上清液的体积一般为300 μL 左右)。
5. 在上清液中加入等体积的溶液B，上下颠倒30秒充分混匀后冰浴5 分钟。
6. 12000-15000 g 室温离心3 分钟，转移上清到新的1.5 mL 塑料离心管中。
7. 加入0.2 mL 的氯fang(自备)，震荡器上充分振荡30秒混匀。
8. 12000-15000 g 室温离心3 分钟，两相交界面将有白色膜状物。小心转移上清到新的1.5 mL 塑料离心管中。
9. 重复7-8 步一次。
10. 加入1 倍体积的异丙醇(自备)，上下颠倒30秒混匀，12000-15000 g 离心5分钟，弃上清，管底将有微小DNA 沉淀。
11. 沉淀用75%乙醇清洗2 次后，室温晾干。
12. 加入50-100 μL 自备TE 溶解DNA 沉淀。DNA 即可用于电泳，酶切和PCR等反应。
