猪端粒酶(TE)ELISA检测试剂盒说明书

产品名称：猪端粒酶(TE)elisa试剂盒
英文名称：Procine TE ELISA Kit
主要成分：酶标板，试剂，标准品等
产品性状：48T/96T，盒装液体
保存条件：2-8℃低温保存
保质期：六个月


样本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
实验仪器：酶标仪、恒温箱、移液器、烧杯、自动洗板机、离心机。
检测方法：酶联免疫吸附法
仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
研究领域：炎症研究、神经生物学、新陈代谢、信号通路、免疫学、传染病、其他研究。
实验前：试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用。
特别说明：本Elisa试剂盒仅供科研实验，不得用于其他用途；使用前仔细阅读ELISA试剂盒说明书。

样品的处理（是否溶血）、孵育时间和温度、加入终止液后的反应条件、洗板条件、加样手法、抗体的纯度、抗体浓度搭配等等，总之和Western Blot不同，ELISA作为定量方法有时候确实是太过敏感，而且本身方法也算有些复杂，各中实验条件的略微改变都可能影响zui终的实验结果。所以操作过程中，必须得严格按照产品说明书进行，以免浪费时间和经费，造成不必要的损失。


实验注明
1.  试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。  实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2.   加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，*个孔与zui后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的 “预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3.   孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4.   洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响zui后的酶标仪读数。
5.  试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请精-确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6.  反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7.  底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
    建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
    如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请zui后乘以稀释倍数。


计算
  以标准物的浓度为纵坐标(对数坐标)，OD值为横坐标(对数坐标)，在对数坐标纸上绘出标准曲线。推荐使用专业制作曲线软件进行分析，如curve expert 1.3，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度，再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。