赖氨酸脱羧酶培养基使用方法

中文名称：赖氨酸脱羧酶培养基
英文名称：Lysine-decarboxylase Test Broth
保存条件：2～8℃,避光储存，拆封后及时放入冰箱冷藏；
保质期： 6个月-1年。
规格：10g/瓶
用途：生化培养基，赖氨酸脱羧酶试验（GB、SN标准）

成分(g/L)：
酵母浸粉             3.0
L-赖氨酸             5.0
葡萄糖               1.0
溴甲酚紫           0.016
pH值6 .7 ± 0.1     25℃

除溴甲酚紫外,将各成分加入蒸馏水中,搅拌均匀,静置约10min,加热至完全溶解,调至pH6.7±0.1。分装于10mm×100mm试管,每管1mL。121℃高压灭菌10min。灭菌后应立即取出放凉,接种培养后,培养基颜色变为深紫色的为阳性反应,变为黄色的,为阴性反应。

用法：称取本品  9.0g ,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,分装于试管(12mm*100mm),每管 1-1.5ml,121℃高压灭菌15 分钟,备用。

配置方法：
将蛋白胨、肉膏、葡萄糖、琼脂及吡哆醛溶化后，调整pH为6.0～6.3。再按量加入溴甲酚紫和甲酚红。在每100ml基础培养基内，分别按1%加入L-赖氨酸。另100ml基础培养基不加氨基酸作为对照。加入氨基酸后再调整pH至6.0～6.3，分装小试管，15磅15分钟灭菌，置高层。使用前，表面覆盖一层灭菌液体石蜡。
赖氨酸脱羧酶培养基用于细菌生化试验。其中蛋白胨、酵母粉提供氮源，葡萄糖提供碳源，溴甲酚紫作为酸碱指示剂，L-赖氨酸作为反应底物。具有氨基酸脱羧酶的细菌，能分解氨基酸使其脱羧生成胺（赖氨酸→尸胺）和二氧化碳，使溶液为碱性,溴甲酚紫保持紫色。如果不脱羧,肠杆菌科的细菌能分解葡萄糖,产酸,溴甲酚紫变为黄色。

氨基酸脱羧的对照管为葡萄糖发酵管,不含氨基酸，由于实验结果阳性的为保持紫色不变,阴性结果为黄色,为保证结果的可靠性,须同时接种对照管,如对照管变为黄色,说明细菌接种成功,证实试验管紫色（不变色）为阳性,而非未接种好细菌。此外,由于氨基酸脱羧的产物为尸胺、腐胺等,遇氧不稳定,故各管接种完细菌后,需加入几滴液体石蜡隔绝空气,保持胺的稳定性。